欧美激情综合色综合啪啪五月,精品亚洲AV一区二区夜夜爽 ,精品欧美一区二区在线观看,囯产精品久久久久久久久免费蜜桃

服務(wù)熱線:
15502280048
技術(shù)支持

您現(xiàn)在的位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  如何科學正確地使用凍存管呢?

如何科學正確地使用凍存管呢?
更新時間:2020-11-23瀏覽:3734次

  如何科學正確地使用凍存管呢?

  凍存管的使用是一門學問,并不是打開液氮罐、放入凍存管、關(guān)上液氮罐這樣簡單的三部曲可以完成的??茖W正確地使用凍存管,可以避免樣本的損失,并保護試驗人員的安全。

  凍存管有IATA航空運輸協(xié)會標準測試證書,常規(guī)儲存細胞培養(yǎng)物,組織樣品,微生物樣品(如病毒,細菌,酵母,真菌,孢子等),人源或動物源其它生物樣品(如血液,血清,精液,抗體,RNA, DNA和蛋白樣本),不適合存儲再生醫(yī)學樣本。

  冷凍步驟:

  用預熱的PBS溶液洗滌細胞,吸取溶液,含有胰蛋白酶和EDTA的溶液覆蓋細胞(薄薄的液層足夠,胰蛋白酶和EDTA的濃度需要根據(jù)細胞系確定)。

  37℃孵育細胞3-5分鐘。

  細胞從底部脫離之后,終止孵育,加入含有血清的培養(yǎng)基,用移液器輕輕地懸浮細胞。

  離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘),用含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮。

  細胞計數(shù)。

  離心細胞懸液(500 x g, 5分鐘),去除上清液,用適量體積的含有血清的培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

  以1:1體積比混合細胞和凍存液(60%培養(yǎng)基,20%胎牛血清,20% DMSO),然后轉(zhuǎn)移到凍存管中。凍存的細胞密度為 1-5×106 個/毫升。

  含有細胞的凍存管建議以−1 K / min 的速率降溫,可以將凍存管置于−70℃含有異丙醇的容器中。如果凍存管存儲其他樣品,可以直接放置在−20℃,−70℃或者液氮的氣相。為了確保樣品冷凍均勻,4 mL和5 mL的凍存管需要先置于在−20℃冰箱過夜,然后再轉(zhuǎn)移到−70℃或者液氮的氣相。

  然后轉(zhuǎn)移凍存管到液氮罐。為了避免污染(如支原體)和安全考慮,請將凍存管置于液氮的氣相,切勿置于液相。

  解凍步驟:

  從液氮罐取出凍存的細胞后立即置于37℃水浴搖晃Cryo.sTM凍存管1-2分鐘。解凍過程需要越快越好。

  轉(zhuǎn)移解凍的細胞于15 mL離心管,立即用大量的含有血清的細胞培養(yǎng)基混勻。

  500 x g離心細胞5 分鐘,去除上清液,用適量的含有血清的細胞培養(yǎng)基重新懸浮細胞,然后轉(zhuǎn)移到細胞培養(yǎng)瓶。

  按照建議的細胞濃度接種。

  接下來的12小時細胞進入靜默期。

  間隔24小時和48小時更換培養(yǎng)基

  如果細胞感染了病毒,也可以參考以上步驟進行冷凍存儲和解凍的操作。

  凍存管安全操作建議

  凍存管用來存儲樣品,只能置于液氮氣相或冰箱。禁止凍存管浸沒于液氮液相,否則液氮可能滲入凍存管。因此,解凍時,蒸發(fā)的液氮產(chǎn)生高壓力,終導致凍存管炸裂,并且還將導致感染物質(zhì)釋放。

  因此,操作凍存管時需要佩戴合適的個人安全防護措施,如穿戴安全護服、佩戴護目鏡、在安全櫥操作。

  進行冷凍保存時,凍存管需要緩慢地降溫至冷凍溫度。如果不是緩慢地降溫到冷凍溫度,將導致冰塞形成(如在凍存管頂部),冰塞將阻礙液體形成凝固,將導致高壓力危險和后續(xù)的爆管風險。

本生(天津)健康科技有限公司 版權(quán)所有    備案號:津ICP備19006588號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸    網(wǎng)站地圖

聯(lián)系電話:
18502669006

微信服務(wù)號

强行剥开两边虐花蒂玩弄| 被下人玩弄的嫡女NP| 双乳被一左一右的吸着| 国产亚洲精品久久久久久久软件| 够力七星彩排列五奖表最新版本 | 粗大老头让我欲仙欲死| 一女被多男玩喷潮视频免费看| 亚洲精品成人区在线观看| 欧美裸体XXXX极品少妇| 日本japanese熟睡人妻| 免费三级网站| 无码精品人妻一区二区三区影院 | 国产毛片A级久久久不卡精品| 欧美疯狂性受xxxxx喷水更猛| 调教YIN荡女友系列合集| 精品国产乱码久久久久久浪潮| 女人18片毛片60分钟| 双性玩弄调教NP产乳孕交灌尿| 欧美多人乱大交XXXXX变态| 成人免费看吃奶视频网站| 最近中文字幕完整视频高清1| 又白又嫩毛又多12P| 少妇被粗大猛进去69影院| 日本动漫瀑乳H动漫啪啪免费 | 没带罩子让他捏了一节课| 人人妻人人澡人人爽欧美精品| 中文无码人妻有码人妻中文字幕| 久久久国产精品无码免费专区| 人人妻人人澡人人爽欧美一区九九| 国产av国产av在在免费线| 无码精品人妻一区二区三区影院| 曰批全过程免费视频在线观看| 日韩精品久久无码中文字幕 | 亚洲国产精品久久久久婷婷老年| 日产亚洲一区二区三区| 色欲AV人妻精品一区二区三区| 露脸叫床粗话东北少妇| 亚洲日韩激情无码一区| 日韩精品在线观看| 黑人添女人囗交做爰视频| 久久妇女高潮喷水多长时间 |